問117薬剤師 第102回
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マウスのある細胞において、タンパク質（ア）及び（イ）の産生は転写因子Ｘにより調節されている。両タンパク質の産生に対するその転写因子の機能を明らかにするため、以下のsiRNA（低分子干渉RNA）導入実験を行った。実験方法、原理と考察に関する記述のうち、適切なのはどれか。2つ選べ。
資料
【実験】 転写因子Ｘに対するsiRNAを導入しない細胞Ａ及び導入した細胞Ｂを 24時間培養した。その後、細胞を破壊し、全タンパク質を回収して、それぞれ試料Ａ及びＢとした。同一タンパク質量の試料Ａ及びＢを用いてSDS‑ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、分離されたゲル中のタンパク質をニトロセルロース膜に転写した。次に、そのニトロセルロース膜においてタンパク質（ア）及び（イ）に対する特異的抗体を用いた抗原抗体反応を行った。その結果、図のようにそれぞれのタンパク質に特異的なバンド（黒色）を検出した。なお、実験に用いたsiRNAは特異的に転写因子ＸのmRNAをノックダウンすること、そのノックダウン効果は培養 24時間の時点で最大となること、さらにタンパク質（ア）及び（イ）のニトロセルロース膜への転写効率に差がないことを確認している。
2つえらぶと、答えと解説が出ます
2つえらぶと、
ここに答えと解説が出ます
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正答 3・5解説
正解は3と5です。図のタンパク質（ア）は、Xをノックダウンした試料Bのバンドが試料Aより太く、Xが減ると産生が増えるので、Xは（ア）の遺伝子の転写を抑制していると考えられます。一方（イ）は試料Bで細くなるので、Xは（イ）の産生を促進しており、4は誤りです。siRNAは標的mRNAを分解させるもので、染色体は壊しません。抗体でタンパク質を検出するのはウェスタンブロット法で、サザンブロット法はDNAを検出します。導入したsiRNAはやがて分解・希釈されるため、効果は時間とともに弱まります。
KEY POINT
siRNA＝mRNA分解の一過性ノックダウン、抗体検出＝ウェスタンブロット「生物」の他の問題
- 第102回 問116真核細胞におけるmRNAからタンパク質への翻訳過程に関する記述について、誤っているのはどれか。1つ選べ。
- 第102回 問118免疫系における胸腺の役割に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。
- 第102回 問115ピリミジンヌクレオチドの代謝に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。
- 第102回 問119移植片拒絶反応について調べるため、２種類の近交系のマウス（A/AとB/B）を用いて、下記のような交配を行った。これらのマウスを用いて皮膚の移植実験を行った…
- 第102回 問114下図は、ヒトの尿素回路（オルニチン回路）の概略を示している。以下の記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。
- 第102回 問120細菌の毒素に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。
出典：厚生労働省「第102回薬剤師国家試験」問題（第2分冊）（厚生労働省）
厚生労働省ホームページの公共データ利用規約（PDL1.0）に基づき、出典を明記して掲載しています。問題文・選択肢は厚生労働省が公表した問題PDFから文字を起こしたもので、内容は変えていません。文字で表す都合で、上付き・下付きの字は小さい字、分数は「分子/分母」の1行、囲み枠の空欄は［ ］で表しています。表・構造式・グラフ・写真は、問題PDFの図を切り抜いて載せています。文意を変える書き換えはしていません。解説は当サイトが独自に作成したものです。
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