問113薬剤師 第106回

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検体中における、ある微生物の存在を調べるために、リアルタイム PCR 法を実施した。以下に示す測定手順で行い、測定した結果を図に示す。この実験に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。 測定手順 3 つの検体（試料 1 ～ 3 ）をサンプルチューブに別々に採取し、それぞれにDNA 抽出用の試薬を加える。 ↓ 抽出した DNA を定量する。 ↓ 各検体から一定量の DNA を別々のチューブに取り、それぞれのチューブに二本鎖 DNA を検出する蛍光色素、デオキシヌクレオチド混合物、プライマー 1 組、酵素を含む反応液を加えて、PCR を開始する。 ↓ 蛍光強度を測定することで、反応産物が増幅されていく経過を追いながら、PCR を約 40 サイクルまで繰り返す。

1. 1目的とする微生物の存在量が最も多かったのは、試料 3 である。×
2. 2この測定手順で、細菌、DNA ウイルス及び RNA ウイルスの検出が可能である。×
3. 3試料 1 と試料 3 に含まれる微生物の存在量は、約 10⁶倍異なると推定される。×
4. 4各試料とも 25 サイクルを超えるあたりから曲線が頭打ちになる主な原因は、デオキシヌクレオチドが枯渇するためである。○
5. 5PCR 開始時に反応液に加える酵素には耐熱性のものを用いる。○

2つえらぶと、答えと解説が出ます