カコモンノート

問112薬剤師 第104回

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第104回

マウスの肝臓から酵素Xの精製を試みた。以下に実験手順の概要(①~④)を示す。 ① ゲル濾過クロマトグラフィーにより肝臓抽出液Aを分画した。 ② 各画分の酵素Xの活性を測定し、その活性が高い画分を集めたものをBとした。 ③ Bを陰イオン交換クロマトグラフィーにより分画した。 ④ 各画分の酵素Xの活性を測定し、その活性が高い画分を集めたものをCとした。 上記A、B及びCの液量、タンパク質濃度、全タンパク質量と酵素活性(全活性及び比活性)を以下の表に示した。比活性とは、試料中のタンパク質の単位重量当たりの酵素活性のことである。なお、酵素活性における 1 U(ユニット)は、 1 分間当たり、 1μmol の生成物を生成する酵素の量を表す。 実験方法及び結果に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。

この問題の図
問題に添えられた図。出典は下に書いています。

2つえらぶと、答えと解説が出ます

2つえらぶと、
ここに答えと解説が出ます
正答 3・4

解説

正解は3と4です。比活性は全活性÷全タンパク質量で、Bは8000÷40.0=200 U/mgとなり、Aの50 U/mgより高くなります。陰イオン交換樹脂は正電荷をもち、負電荷をもつタンパク質を保持するので、酵素Xが保持されたと考えられます。Bの全活性8000 UはAの10000 Uの80%にあたり、20%ではありません(1は誤り)。ゲル濾過では分子量の大きいものほど早く溶出されます(2は誤り)。Cの比活性は7000÷5.00=1400 U/mgで、140 U/mgではありません(5は誤り)。

KEY POINT
比活性=全活性÷全タンパク質量、回収率は全活性で比べる
出典:厚生労働省「第104回薬剤師国家試験」問題(第2分冊)(厚生労働省)
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