問115薬剤師 第104回

115 / 345問

遺伝子Ｘの転写は薬物ア及びイにより促進される。両薬物による遺伝子Ｘの転写促進に関わるプロモーター領域中の DNA 部位を同定するために、レポーター遺伝子を用いたプロモーター解析実験を行った。以下に実験方法の概要を記す。 実験方法の概要 図 1 に示したように、遺伝子Ｘの転写開始点から 200 bp 上流（-200 bp）までのDNA を合成し、それをレポーター遺伝子に連結して発現ベクターを作製した（Ａ）。また、Ａより上流域が短い 4 種類の DNA を合成して、同様にベクターを作製した（Ｂ～Ｅ）。次に、Ａ～Ｅの組換え DNA を導入した哺乳動物由来細胞を作製した。これらの細胞において薬物ア又はイで処理した際のレポーター遺伝子産物を測定し、図 2 の結果を得た。レポーター遺伝子のみを持つベクターを導入した細胞では、薬物処理の有無に関わらずレポーター遺伝子産物は発現されなかった。なお、細胞への DNA 導入効率は等しく、細胞培養条件やレポーター遺伝子産物などが転写活性に影響を及ぼさないことを確認している。 哺乳動物由来細胞における転写調節とプロモーター解析実験の方法及び考察に関する記述のうち、誤っているのはどれか。1つ選べ。

1. 1RNA ポリメラーゼは、転写因子を介してプロモーターに結合する。×
2. 2レポーター遺伝子として、ホタル由来のルシフェラーゼ遺伝子が用いられることがある。×
3. 3転写開始点から 80 bp 上流～40 bp 上流の DNA 配列は、薬物アによるレポーター遺伝子産物の発現増加に関与していると考察される。×
4. 4転写開始点から 120 bp 上流～80 bp 上流の DNA 配列は、薬物イによるレポーター遺伝子産物の発現増加に関与していると考察される。○
5. 5転写開始点から 40 bp 上流までの DNA 配列は、薬物ア及びイのいずれにも依存しない恒常的なレポーター遺伝子産物の発現に関与していると考察される。×

選択肢をえらぶと、答えと解説が出ます